浮游菌采樣器的測(cè)試流程，原來(lái)可以這么簡(jiǎn)潔

   浮游菌采樣器用于制藥GMP廠房、乳制品廠房、、生物潔凈、發(fā)酵工業(yè)等潔凈室和無(wú)菌環(huán)境中的空氣微生物檢測(cè)以及有關(guān)研究教學(xué)部門作空氣微生物的采樣研究。

浮游菌采樣器一種多孔吸入式塵菌采樣器。它根據(jù)顆粒撞擊原理和等速采樣理論設(shè)計(jì)，采樣直接，采樣口風(fēng)速與潔凈室內(nèi)風(fēng)速基本一致，能更準(zhǔn)確地反映潔凈室內(nèi)的微生物濃度。采樣時(shí)，帶塵菌空氣高速通過(guò)微孔，被撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的瓊脂表面;這些活體微生物在培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)生動(dòng)態(tài)再水化過(guò)程，高速生長(zhǎng)，從而更快得出結(jié)果。

浮游菌采樣器的測(cè)試流程：

測(cè)試方法

4.1 方法提要

本方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過(guò)收集懸游在空氣中的性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微數(shù)，以此來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。

4.2 所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基

a）浮游菌采樣器；

b）真空抽氣泵；

c）培養(yǎng)皿；

d）培養(yǎng)基；

e）恒溫培養(yǎng)箱。

4.3 浮游菌采樣器

浮游菌采樣器宜采用撞擊法機(jī)理的采樣器，一般采用狹縫式采樣器或離心式采樣器。

4.3.1 采用的浮游菌采樣器須要有流量計(jì)和定時(shí)器。

4.3.2 狹縫式采樣器的原理

狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣，通過(guò)采樣器的縫隙式平板，將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉(zhuǎn)的平板培養(yǎng)基表面上，附著的活微粒子經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。

4.3.3 離心式采樣器的原理

離心式采樣器由于內(nèi)部風(fēng)機(jī)的高速旋轉(zhuǎn)，氣流從采樣器前部吸入從后部流出，在離心力的作用下，空氣中的活微粒子有足夠的時(shí)間撞擊到專用的固形培養(yǎng)條上，經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。

4.3.4 狹縫式采樣器的使用要點(diǎn)

應(yīng)嚴(yán)格按儀器說(shuō)明書的要求進(jìn)行操作。

4.3.4.1 校驗(yàn)

采樣器須按儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定，以保證測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性。校驗(yàn)的項(xiàng)目有：定時(shí)器、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速、流量計(jì)。

4.3.2 每次測(cè)試前應(yīng)按說(shuō)明書上的規(guī)定，先接通電源，啟動(dòng)真空抽氣泵，然后調(diào)節(jié)流量計(jì)及定時(shí)器。

4.3.4.3空氣采樣量根據(jù)需要選定。已知采樣器的流量（L/min），設(shè)定采樣時(shí)間（min），兩者相乘即采樣量（L）。

4.3.4.4 注意事項(xiàng)

4.3.4.4.1 采樣口須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造。

4.3.4.4.2 采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑。

4.3.4.4.3 采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)點(diǎn)的高度定，盡量減少?gòu)澢?/span>

4.4 真空抽氣泵

4.4.1 真空抽氣泵的排氣量應(yīng)與采樣器匹配。

4.4.2  宜采用無(wú)油真空抽氣泵，必要時(shí)可在非氣口安裝氣體過(guò)濾器。

4.4.3 真空抽氣泵安裝的位置須適當(dāng)，一般裝在采樣器下面。

4.5 培養(yǎng)皿

4.5.1 狹縫式采樣器一般采用?150mm×15mm、?90mm×15mm、?65mm×15mm三種規(guī)格的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。可根據(jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。

4.5.2 離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。

4.6 培養(yǎng)基

普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基。其配制方法見(jiàn)附錄A（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）。

浮游菌采樣器

4.7 恒溫培養(yǎng)箱

須定期對(duì)培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。

4.8 測(cè)試步驟

4.8.1 測(cè)試前儀器、培養(yǎng)皿表面須嚴(yán)格消毒。

4.8.1.1 采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級(jí)潔凈室的采樣器宜一直放在被測(cè)房間內(nèi)。

4.8.1.2 用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。

4.8.1.3采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。

4.8.1.4采樣口及采樣管，使用前須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí)，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。

4.8.1.5 采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。

4.8.2 狹縫式采樣器的采樣程序

4.8.2.1儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。

4.8.2.2 關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。

4.8.2.3 置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開(kāi)啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。

4.8.3 培養(yǎng)

4.8.3.1 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4.8.3.2 在30℃～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。

4.8.3.3 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。可每批選定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。

4.8.4 菌落計(jì)數(shù)

4.8.4.1 用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5～10倍放大鏡檢查，有否遺漏。

4.8.4.2 若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。

4.8.5 注意事項(xiàng)

4.8.5.1 使用前仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。

4.8.5.2 采取一切措施防止采樣管的污染和其他為對(duì)樣本的污染。

4.8.5.3 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。

4.8.5.4由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。